蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義

蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫(kù)"器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應(yīng)酶，既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解，是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對(duì)于植物蔗糖合成具有重要意義。

測(cè)定原理

SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖，蔗糖與反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。

激活素BELISA試劑盒 ACVB免費(fèi)代測(cè)試劑

激活素A受體ⅡAELISA試劑盒 ACVR2A免費(fèi)代測(cè)試劑

激活STAT蛋白抑制因子1ELISA試劑盒 PIAS1免費(fèi)代測(cè)試劑

畸胎瘤衍生生長(zhǎng)因子1ELISA試劑盒 TDGF1免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白8ELISA試劑盒 MXRA8免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白5ELISA試劑盒 MXRA5免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)抗原3ELISA試劑盒 STAG3免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)抗原2ELISA試劑盒 STAG2免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)抗原1ELISA試劑盒 STAG1免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬28ELISA試劑盒 MMP28免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬27ELISA試劑盒 MMP27免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬26ELISA試劑盒 MMP26免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬24ELISA試劑盒 MMP24免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬23AELISA試劑盒 MMP23A免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬21ELISA試劑盒 MMP21免費(fèi)代測(cè)試劑
蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測(cè)試盒氨基肽酶(LAP)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

磷丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒/微量法100T/96S

磷果糖激酶(PFK)測(cè)試盒/紫外比色法50T/48樣

磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測(cè)試盒/紫外比色法50T/48樣

磷烯醇式丙酮羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷烯醇式丙酮羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒/微量法100管/96樣
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。