磷脂酶A2(PLA2)測(cè)試盒

商品詳情：
測(cè)定意義

磷脂酶A2(EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂?；饷?，廣泛存在于動(dòng)植物組織、細(xì)菌、細(xì)胞核分泌物中，參與脂肪消化，精子成熟、細(xì)胞信號(hào)傳遞、脂質(zhì)過(guò)氧化修復(fù)、宿主反應(yīng)等生理過(guò)程，在控制體內(nèi)磷脂類(lèi)物質(zhì)平衡、調(diào)節(jié)機(jī)體新陳代謝、參與疾病的病理進(jìn)程等方面發(fā)揮著及其重要的作用。

測(cè)定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸膽(HEPC)產(chǎn)生游離巰基，與DTNB反應(yīng)生成黃色物質(zhì)，在412nm處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、超速冷凍離心機(jī)、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。
樣品中AA提取：

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

旋轉(zhuǎn)蛋白ELISA試劑盒 RTTN免費(fèi)代測(cè)試劑

旋光蛋白ELISA試劑盒 OPTC免費(fèi)代測(cè)試劑

序列相似家族5成員CELISA試劑盒 FAM5C免費(fèi)代測(cè)試劑

序列相似家族20成員AELISA試劑盒 FAM20A免費(fèi)代測(cè)試劑

序列相似家族132成員AELISA試劑盒 FAM132A免費(fèi)代測(cè)試劑

嗅素3ELISA試劑盒 OLFM3免費(fèi)代測(cè)試劑

嗅素2ELISA試劑盒 OLFM2免費(fèi)代測(cè)試劑

嗅素1ELISA試劑盒 OLFM1免費(fèi)代測(cè)試劑

嗅蛋白ELISA試劑盒 Olfactorin免費(fèi)代測(cè)試劑

休眠蛋白ELISA試劑盒 RSN免費(fèi)代測(cè)試劑

雄烯酮ELISA試劑盒 ADT免費(fèi)代測(cè)試劑

雄激素誘導(dǎo)蛋白1ELISA試劑盒 AIG1免費(fèi)代測(cè)試劑

胸腺因子ELISA試劑盒 TF免費(fèi)代測(cè)試劑

β4ELISA試劑盒 Tβ4免費(fèi)代測(cè)試劑

β10ELISA試劑盒 TMSβ10免費(fèi)代測(cè)試劑
磷脂酶A2(PLA2)測(cè)試盒肝脂酶（HL）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣

肝脂酶（HL）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣

甘油三酯（TG）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

甘油三酯（TG）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

總（TC）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

總（TC）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

游離（FC）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣

游離（FC）比色法檢測(cè)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

乙酰羧化酶（ACC）比色法檢測(cè)試劑盒 微量法 100管/48樣
注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。